高效液相色譜（1）-Angilent-1260液相操作規(guī)程
一 開(kāi)機(jī)
1) 打開(kāi)計(jì)算機(jī)，登陸windows操作系統(tǒng)。
2) 打開(kāi)主機(jī)各模塊電源（從上至下），待各模塊完成自檢后，再雙擊桌面“儀器1聯(lián)機(jī)”圖標(biāo),進(jìn)入化學(xué)工作站，從“視圖”菜單中選擇“方法和運(yùn)行控制”畫(huà)面。
3) 把各流動(dòng)相放入溶劑瓶中。
4) 旋開(kāi)排氣閥（逆時(shí)針），右單擊“四元泵”圖標(biāo)出現(xiàn)快捷鍵，點(diǎn)擊“方法”選項(xiàng)進(jìn)入泵編輯畫(huà)面。將泵流量設(shè)到5ml/min，溶劑A設(shè)到100%，打開(kāi)泵，排出管線中的氣體2—3分鐘，直到管線內(nèi)由溶劑瓶到泵入口無(wú)氣泡為止,查看柱前壓力（若大于10bar，則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)過(guò)濾白頭）。
5) 依此切換到B、C、D溶劑分別排氣。
6) 將泵的流量設(shè)到0.5ml/min，多元泵則再設(shè)定溶劑配比，如A=80%，B=20%；關(guān)閉排氣閥（順時(shí)針）。
7) 再將泵的流量設(shè)到0.8ml/min，2分鐘后將泵的流量設(shè)到1ml/min，沖洗色譜柱20—30分鐘。
8) 把緩沖液換成流動(dòng)相，待柱前壓力基本穩(wěn)定后,打開(kāi)檢測(cè)器燈，觀察基線情況。
二 數(shù)據(jù)采集方法編輯
1) 編輯樣品信息：由“運(yùn)行控制”進(jìn)入“樣品信息”，設(shè)定操作者姓名，樣品數(shù)據(jù)文件名等。
2) 編輯完整方法：從“方法”菜單中選擇“編輯完整方法”項(xiàng).選中項(xiàng)單擊“確定”入下一畫(huà)面“方法注釋”，編輯好單擊“確定”進(jìn)入下一畫(huà)面“選擇進(jìn)樣源”，選中Als單擊“確定”入下一畫(huà)面“設(shè)置方法”進(jìn)行參數(shù)設(shè)定。
3) 四元泵參數(shù)設(shè)定：在“流速”處輸入流量,如1ml/min,在“溶劑”處選中B輸入80%(A=100-B-C-D)，在右面注釋欄中標(biāo)明各溶劑的名稱(chēng)；設(shè)置“停止時(shí)間”和“后運(yùn)行時(shí)間”，在“壓力限值”處輸入柱子的最大耐高壓以保護(hù)柱子如：250bar，在“時(shí)間表”添加編輯梯度。
4) 進(jìn)樣器參數(shù)設(shè)定：在進(jìn)樣模式中輸入進(jìn)樣量xxul?！皹?biāo)準(zhǔn)進(jìn)針” ——只能輸入進(jìn)樣體積此方式無(wú)洗針功能?！搬樓逑春筮M(jìn)樣” ——可以輸入進(jìn)樣體積和洗瓶位置為xx，此方式針從樣品瓶抽完樣品后會(huì)在洗瓶中洗針。
5) 進(jìn)樣器進(jìn)樣程序參數(shù)設(shè)定：選中使用進(jìn)樣程序，在“函數(shù)”中添加相應(yīng)函數(shù)即可按程序進(jìn)樣。
6) TCC檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定：在“溫度”左側(cè)下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,右側(cè)選中“與左側(cè)相同” ——使柱溫箱的溫度左右一致。
7) VWD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定：在“波長(zhǎng)”下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng),如254nm,在“峰寬(響應(yīng)時(shí)間)”下方點(diǎn)擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時(shí)間,如>0.1min(2s),再設(shè)置“停止時(shí)間”和“后運(yùn)行時(shí)間”。
8) 儀器曲線設(shè)置：默認(rèn)即可。
三 數(shù)據(jù)處理
1) 從“視圖”菜單中單擊“數(shù)據(jù)分析”進(jìn)入數(shù)據(jù)分析畫(huà)面
2) 從“文件”菜單選擇“調(diào)用信號(hào)”選中您的數(shù)據(jù)文件名，單擊“確定”。
3) 譜圖優(yōu)化,從“圖形”菜單中選擇“信號(hào)選項(xiàng)”從“范圍”中選擇“自動(dòng)量程”及合適的顯示時(shí)間單擊“確定”,或選擇”自定義量程”調(diào)整,反復(fù)進(jìn)行直到圖的比例合適為止。
4) 積分:從“積分”中選擇“自動(dòng)積分”,積分結(jié)果不理想,再?gòu)牟藛沃羞x“積分事件”，選項(xiàng)選擇合適的“斜率靈敏度,峰寬,最小峰面積,最小峰高”.從“積分”菜單中選擇“積分”選項(xiàng)則數(shù)據(jù)被積分.如積分結(jié)果不理想則修改相應(yīng)的積分參數(shù)直到滿(mǎn)意為止。單擊左邊圖標(biāo)將積分參數(shù)存入方法。
5) 校正表設(shè)計(jì)：點(diǎn)擊“校正”菜單中的“校正設(shè)置”，給出各個(gè)參數(shù)：點(diǎn)擊“確定”；調(diào)出建立校正表所需的譜圖并對(duì)譜圖進(jìn)行圖形優(yōu)化和積分優(yōu)化；點(diǎn)擊“校正”菜單中的“新建校正表；在“新建校正表”欄里選定“自動(dòng)設(shè)定”點(diǎn)擊“確定”；在“校正表”中給出正確的“化合物名”和“含量”；如需增加校正點(diǎn)數(shù)，給出第二校正點(diǎn)的“含量”，校正表建立完成后點(diǎn)擊“確定“，點(diǎn)擊“保存圖標(biāo)”將校正表存入方法中。
6) 打印報(bào)告:從“報(bào)告”菜單中選擇“設(shè)定報(bào)告”選項(xiàng)進(jìn)入畫(huà)面:單擊“定量結(jié)果”框中“定量”右側(cè)的黑三角選中“百分比法”面積百分比其它選項(xiàng)不變單擊“確定”.從“報(bào)告”菜單中選擇“打印”則報(bào)告結(jié)果將打印到屏幕上如想輸出到打印機(jī)上則單擊“報(bào)告”底部的“打印”鈕。
四 關(guān)機(jī)
1) 關(guān)機(jī)前，用95%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5—1小時(shí)，流量0.5—1ml/min，再用100%有機(jī)溶劑沖0.5小時(shí)，然后關(guān)泵。
2) 退出化學(xué)工作站，及其它窗口，關(guān)閉計(jì)算機(jī)（用shutdown關(guān)）。
3) 關(guān)掉主機(jī)電源開(kāi)關(guān)。
注意事項(xiàng)：
1) 氘燈是易耗品，應(yīng)最后開(kāi)燈，不分析樣品即關(guān)燈。
2) 開(kāi)機(jī)時(shí)，打開(kāi)排氣閥，100%水，泵流量5ml/min，若此時(shí)顯示壓力>10bar，則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)玻璃料。
3) 流動(dòng)相使用前必須過(guò)濾，不要使用多日存放的蒸餾水（易長(zhǎng)菌）。
4) 流動(dòng)相使用前必須進(jìn)行脫氣處理，可用超聲波振蕩10-15min。
5) 配制90%水+10%異丙醇，以每分2—3滴的速度虹吸排出，進(jìn)行seal-wash，溶劑不能干涸。
6) 當(dāng)使用緩沖溶液時(shí)，要用水沖洗手動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣口，同時(shí)搬動(dòng)進(jìn)樣閥數(shù)次，每次數(shù)毫升。
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