液相色譜儀沖洗是正常工作的保障
運(yùn)用液相色譜儀HPLC體系杰出運(yùn)行的第三個(gè)關(guān)鍵是堅(jiān)持體系的清潔。你需求重視活動(dòng)相流經(jīng)該體系的一切當(dāng)?shù)?，關(guān)于這些當(dāng)?shù)亟?jīng)常性的沖刷，將使你的體系堅(jiān)持在“Ready”狀態(tài)。
1、活動(dòng)相儲(chǔ)液瓶
首先要經(jīng)常清洗活動(dòng)相儲(chǔ)液瓶，或者每做一批新樣品替換一次活動(dòng)相。一個(gè)臟的儲(chǔ)液瓶將會(huì)污染注入的活動(dòng)相。主張儲(chǔ)液瓶中緩沖液運(yùn)用時(shí)刻不要超過(guò)一周，而有機(jī)溶劑運(yùn)用時(shí)刻不要超過(guò)一個(gè)月。也有人主張儲(chǔ)液瓶中堅(jiān)持用溶劑充溢，直到替換剖析方法儲(chǔ)液瓶需替換新溶劑（活動(dòng)相組成發(fā)生變化）時(shí)，將舊溶劑倒掉替換新溶劑，這樣勝于將溶劑用完。但這關(guān)于剖析樣品量少的實(shí)驗(yàn)室而言似乎有些糟蹋。儀器公司的工程師主張儲(chǔ)水瓶的水要天天換，每周瓶子還應(yīng)該用異丙醇清洗一次。有的實(shí)驗(yàn)室則在水里加入0.1～1 mM的甲酸抑制微生物的成長(zhǎng)。這些做法看起來(lái)有些繁瑣，但卻能起到“磨刀不誤砍柴工”作用。
2、泵
接下來(lái)要沖刷的是泵。千萬(wàn)不要一剖析完沖幾分鐘后就停泵，特別是當(dāng)活動(dòng)相中含有難蒸發(fā)的緩沖液（如磷酸鹽）時(shí)。假如儀器不是連續(xù)運(yùn)用，當(dāng)活動(dòng)相蒸發(fā)時(shí)，難蒸發(fā)物就會(huì)粘在活塞密封墊的外表，難蒸發(fā)物將構(gòu)成固形物堆積。這是泵密封墊磨損和單向閥滲漏的主要原因之一。所以，無(wú)論運(yùn)用長(zhǎng)短，在停泵以前一定要用非緩沖液活動(dòng)相沖刷泵在半個(gè)小時(shí)以上，要是活動(dòng)相中有難蒸發(fā)緩沖鹽則主張沖刷的時(shí)刻應(yīng)該更長(zhǎng)些。
3、自動(dòng)進(jìn)樣器
自動(dòng)進(jìn)樣器也要按規(guī)則清洗。現(xiàn)在的儀器多配有自動(dòng)進(jìn)樣器的沖刷液瓶，一般只需注意及時(shí)替換、彌補(bǔ)沖刷液即可。自動(dòng)進(jìn)樣器用的洗滌液也要采用與活動(dòng)相相同的方式處理，并根據(jù)溶劑的有用期和規(guī)則，清洗儲(chǔ)液瓶或替換洗滌液?，F(xiàn)在的自動(dòng)進(jìn)樣器設(shè)置、操作都很簡(jiǎn)單，假如時(shí)刻允許（特別是利用夜間運(yùn)行），每次剖析完后設(shè)置進(jìn)1、2針純?nèi)軇ㄈ缂状肌⒁译妫?，也是一個(gè)好做法。
4、色譜柱
對(duì)色譜柱的污染是隨運(yùn)用時(shí)刻而增加。一般表現(xiàn)是：運(yùn)行走基線時(shí)在記載的色譜圖中基線噪音增加，泵壓也增加。解決這個(gè)問(wèn)題的zui有用方法就是在每一批樣品剖析完畢后或預(yù)備卸下柱子時(shí)用大量的活動(dòng)相沖刷柱子（例如，甲醇、乙腈和水）。用梯度沖刷作用更好，具體的份額要根據(jù)柱子的說(shuō)明書(shū)和性質(zhì)而定。
5、檢測(cè)器
假如是正常運(yùn)用，檢測(cè)器將根據(jù)其性質(zhì)并按照說(shuō)明書(shū)規(guī)則進(jìn)行洗。例如UV/VIS檢測(cè)器或FL檢測(cè)器，在對(duì)柱子和體系進(jìn)行沖刷時(shí)也就一同對(duì)檢測(cè)器流通池中污染物進(jìn)行了清洗?？墒钦舭l(fā)光檢測(cè)器或質(zhì)譜儀則需求按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行定時(shí)清洗。這些檢測(cè)器在運(yùn)用時(shí)會(huì)有難蒸發(fā)污染物堆積，如質(zhì)譜儀離子源的噴針、毛細(xì)管、錐孔板、預(yù)四極等部件，因此需求定時(shí)清洗。并且對(duì)聯(lián)有這些檢測(cè)器的體系沖刷時(shí)，zui好與這些檢測(cè)器斷開(kāi)，以減少對(duì)檢測(cè)器的污染。
總歸，實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)用的液相色譜儀要是能認(rèn)真做好這三項(xiàng)工作——脫氣、過(guò)濾和沖刷，你的儀器可以得到杰出的預(yù)防性維護(hù)，運(yùn)用時(shí)就會(huì)感到比較順手。當(dāng)然，在實(shí)際操作時(shí)遇到的問(wèn)題并沒(méi)有這么簡(jiǎn)單，但這三個(gè)杰出習(xí)慣將是正確操作、運(yùn)用HPLC體系的基礎(chǔ)。
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