怎么判斷色譜柱何時(shí)該換新柱了
標(biāo)題：怎么判斷色譜柱何時(shí)該換新柱了？
色譜工作者常會(huì)碰到這樣的問(wèn)題，什么時(shí)分該換色譜柱了? 色譜柱的塔板數(shù)能表現(xiàn)色譜柱的狀況嗎?確認(rèn)標(biāo)明一支色譜柱應(yīng)該“退休”的規(guī)范，從經(jīng)驗(yàn)來(lái)看，當(dāng)一支色譜柱的塔板數(shù)降低到新柱子時(shí)的百分之多少時(shí)就能夠以為該色譜柱不能再運(yùn)用了呢?在您的實(shí)驗(yàn)室里是怎么判斷一根色譜柱不能夠再用了呢?
相信每個(gè)色譜工作者都會(huì)關(guān)心分辨率，分辨率是調(diào)查一根色譜柱別離詳細(xì)樣品的好壞程度的目標(biāo)。色譜的中心任務(wù)便是為了使每個(gè)峰完結(jié)別離，咱們?cè)趯?shí)際工作中需要得到合理峰寬的窄峰以便獲得較低的檢測(cè)限(這現(xiàn)已不是什么難題，現(xiàn)在的色譜柱都能夠達(dá)到這個(gè)要求)。
較好的辦法是運(yùn)用壓力、分辨率和峰形的混合目標(biāo)來(lái)調(diào)查一根色譜柱的狀況。壓力的丈量是zui簡(jiǎn)單的，一般咱們確認(rèn)的色譜辦法要滿足以下的要求：用新柱子時(shí)柱壓不高于2500psi，在任何狀況下壓力都不超越3000psi。雖然現(xiàn)代的液相色譜體系都可在更高的壓力下運(yùn)用，但因?yàn)楦邏寒a(chǎn)生的體系損耗和泄漏的問(wèn)題會(huì)很?chē)?yán)峻。當(dāng)壓力超越3000psi時(shí)，考慮替換進(jìn)樣器和色譜柱之間的0.5mm孔徑的在線濾片。假如替換濾片后壓力依然高，則色譜柱的濾片或者是色譜柱現(xiàn)已被污染，這提示咱們?cè)摀Q柱子了。有計(jì)算標(biāo)明，超越60%的色譜柱損壞是因?yàn)閴毫^(guò)高的原因。
分辨率是咱們調(diào)查色譜柱的一個(gè)非常重要的目標(biāo)，只需兩個(gè)組分能夠獲得基線別離，對(duì)該剖析物的定量就不會(huì)有什么問(wèn)題。對(duì)于對(duì)稱的高斯峰來(lái)講，1.5的分辨率即可得到基線別離;若Rs在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴(yán)峻則需要更高的分辨率。運(yùn)用分辨率作為色譜柱的評(píng)價(jià)目標(biāo)的優(yōu)點(diǎn)在于咱們能夠直觀地看到相鄰的峰的別離狀況。
別的一個(gè)調(diào)查色譜柱質(zhì)量的規(guī)范是峰形拖尾狀況，廠家測(cè)試報(bào)告的峰形都非常美麗，但這并不代表該色譜柱剖析實(shí)際樣品的狀況。實(shí)際樣品中總是含有或多或少引起峰形拖尾的組分。zui值得一提的是含有氮原子的化合物，這些化合物和硅膠骨架上的游離硅羥基結(jié)合非常嚴(yán)密，隨著色譜柱運(yùn)用時(shí)刻越長(zhǎng)，鍵合相丟失，拖尾則更加嚴(yán)峻。然而拖尾狀況的改動(dòng)不像分辨率的改動(dòng)那樣能夠馬上看出來(lái)。基于此，zui好定一個(gè)拖尾因子的上限，如美國(guó)藥典規(guī)則拖尾因子不超越1.8。
確認(rèn)色譜柱“拋棄”規(guī)范的zui佳時(shí)刻是當(dāng)咱們開(kāi)發(fā)剖析辦法或作辦法認(rèn)證的時(shí)分。一般，在開(kāi)發(fā)剖析辦法的過(guò)程中你會(huì)實(shí)驗(yàn)幾根色譜柱，剖析足夠多的實(shí)際樣品，你知道當(dāng)別離變差的時(shí)分是什么樣的狀況。我傾向于在開(kāi)始時(shí)運(yùn)用一個(gè)寬的范圍。咱們的經(jīng)驗(yàn)是這樣的：你假如在開(kāi)始時(shí)緊縮體系適用性要求，在辦法認(rèn)證后再放寬這個(gè)要求是很困難的。在剖析實(shí)際樣品之前進(jìn)行體系適用性調(diào)查，以保證該色譜辦法滿足剖析者能夠承受的規(guī)范。
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