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熒光酶標儀和光吸收酶標儀原理介紹

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時間:2019-10-08 15:03:02

酶標儀是構(gòu)成酶免查驗工作站的其間一種醫(yī)療器械,還有一個比較重要的設(shè)備是洗板機,酶標儀有熒光酶標儀和光吸收酶標儀之分,那么熒光酶標儀原理與光吸收酶標儀原理有什么區(qū)別呢?具體內(nèi)容如下所示:


熒光酶標儀原理

由光源氙弧燈發(fā)出的光經(jīng)過切光器使其變成斷續(xù)之光以及激起光單色器變成單色光后,此光即為熒光物質(zhì)的激起光,被測的熒光物質(zhì)在激起光照耀下所發(fā)出的熒光,經(jīng)過單色器變成單色熒光后照耀于測樣品用的光電倍增管上,由其所發(fā)生的光電流經(jīng)過放大器放大輸至記載儀,激起光單色器和熒光單色器的光柵均由電動機帶動的凸輪所控制,當測繪熒光發(fā)射光譜時,將激起光單色器的光柵,固定在zui恰當?shù)募て鸸獠ɡ妫専晒鈫紊魍馆啙L動,將各波長的熒光強度訊號輸出至記載儀上,所記載的光譜即發(fā)射光譜。

當測繪熒光激起光譜時,將熒光單色器的光柵固定在zui恰當?shù)臒晒獠ɡ?,只讓激起光單色口的凸輪滾動,將各波長的激起光的強度訊號輸出至記載儀,所記載的光譜即激起。

當進行樣品溶液的定量分析時,將激起光單色器固定在所挑選的激起光波利益,將熒光單色器調(diào)理至所挑選的熒光波利益,由記載儀得出的信號是樣品溶液的熒光強度。


光吸收酶標儀原理

光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大于780nm稱為紅外光。光吸收酶標儀測定的原理是在特定波長下,檢測被測物吸光值。jjymafwh

光經(jīng)過被檢測物,前后的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量聯(lián)系。

檢測單位用OD值表明,OD是opticaldelnsity(光密度)的縮寫,表明被檢測物吸收掉的光密度,OD=1og(1/trans),其間trans為檢測物的透光值。依據(jù)Bouger-amberT-beer規(guī)律,OD值與光強度成下述聯(lián)系:E=OD=logΙ0/Ι其間E表明被吸收的光密度,Ι0為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。


OD值由下述公式核算:

E=OD=C×D×E

C為檢測物的濃度

D為檢測物的厚度

E為摩爾因子


在特定波長下測定每一種物質(zhì)都有其特定的波長,在此波長下,此物質(zhì)能夠吸收zui多的光能量。如果挑選其它的波長段,就會形成檢測成果的不準確。因此,在測定檢測物時,我們挑選特定的波長進行檢測,稱為測量波長。


可是每一種物質(zhì)對光能量還存在一定的非特異性吸收,為了消除這種非特異性吸收,我們再選取一個參照波長,以消除這個不準確性。在參照波長下,檢測物光的吸收zui小。酶標儀檢測波長和參照波長的吸光值之差能夠消除非特異性吸收。




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