賽默飛世爾三大氨基柱色譜柱的區(qū)別及維護(hù)
無論氣相仍是液相，色譜柱都是別離的核心。液相色譜柱的固定相可以說是形形色色，有C18，C8，C4，苯基柱，氰基柱，氨基柱等等。色譜柱運(yùn)用的好壞，直接關(guān)系到剖析別離的結(jié)果，咱們都知道氨基柱有運(yùn)用壽命短等問題，今日在這里給咱們帶來氨基柱的運(yùn)用保護(hù)攻略，希望通過更好的保護(hù)運(yùn)用，讓咱們手中的色譜柱發(fā)揮出更大的效果。
說起氨基柱，咱們了解的是拿它來做糖的剖析。這是一個(gè)典型的HILIC形式。除了HILIC形式以外，氨基柱還可以用做正相和弱陰離子交流兩種形式?？梢哉f應(yīng)用范圍和形式非常廣。
ThermoFisher色譜柱系列咱們族中擁有三款氨基鍵合相的色譜柱，分別是Hypersil GOLD Amino、Syncronis Amino和Hypersil APS-2。有人會(huì)問，都是氨基柱，他們的差異又在哪里呢?
讓小編來給咱們逐個(gè)做個(gè)介紹。Hypersil Gold Amino這款氨基柱具有更對(duì)稱的峰型，在生產(chǎn)工藝上有更致密的鍵合技能，硅膠表面殘存的硅醇基數(shù)量低。Syncronis Amino這款氨基柱金屬雜質(zhì)含量在同類色譜柱中低，可以帶來更高的柱效,而Hypersil APS-2這款氨基柱在別離多組分化合物時(shí)更具優(yōu)勢(shì)，并且在美國(guó)藥典和歐洲藥典中多有應(yīng)用。說了這么多咱們看看下面該怎么運(yùn)用保護(hù)。
保存液
（Gold Amino和Syncronis Amino）出廠保存液為乙醇，APS-2柱出廠保存液為：異辛烷：乙醇：水=85:14.7:0.3，新色譜柱假如運(yùn)用反相活動(dòng)相條件，請(qǐng)充沛置換色譜柱內(nèi)正相溶劑。
活化
新色譜柱假如運(yùn)用HILIC形式，運(yùn)用前請(qǐng)運(yùn)用異丙醇小流速過夜平衡色譜柱。流速主張0.1mL/min,之后再轉(zhuǎn)換到100%乙腈沖刷20柱體積，然后轉(zhuǎn)換到和活動(dòng)相相同比例的不含鹽的乙腈水系統(tǒng)沖刷20柱體積。
沖刷
用乙腈：水=60:40條件對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗，清洗時(shí)，不主張水相比例超越40%，過高運(yùn)用水相容易導(dǎo)致鍵合相水解。
色譜柱再生
當(dāng)色譜柱通過長(zhǎng)期運(yùn)用，柱效很低時(shí)，可以對(duì)色譜柱再生處理，用乙腈：水（水中參加0.05%氨水）=60:40條件沖刷30柱體積。
保存
一個(gè)月以內(nèi)的保存，請(qǐng)運(yùn)用與所選用活動(dòng)相組成相同的有機(jī)溶劑和水的混合溶液（不含酸、無機(jī)鹽）進(jìn)行置換，請(qǐng)避免只用水進(jìn)行置換；一個(gè)月以上的長(zhǎng)期保存，在進(jìn)行了上述處理之后，請(qǐng)用乙腈置換并保存。
氨基柱糖類的分析
1、請(qǐng)?jiān)O(shè)定乙腈/水的活動(dòng)相條件。乙腈的濃度越高，則對(duì)糖的保存才能越強(qiáng)。
2、若選用含甲醇或緩沖鹽的活動(dòng)相，峰會(huì)展寬。
3、若將糖的水溶液作為樣品注入，譜峰會(huì)展寬。請(qǐng)運(yùn)用含乙腈50%以上的溶劑來制造糖類樣品。
4、曾在酸性條件下運(yùn)用過的色譜柱，糖類剖析的保存時(shí)間、峰形會(huì)發(fā)生變化。
離子型物質(zhì)的分析
1、請(qǐng)?jiān)O(shè)定乙腈/磷酸緩沖液且具有必定pH值的活動(dòng)相條件。
2、調(diào)查活動(dòng)相條件時(shí)，按照pH由高到低的次序進(jìn)行調(diào)查。假如曾經(jīng)在低pH下運(yùn)用，填料的表面將無法回到初始狀況。
3、有時(shí)需要長(zhǎng)期平衡色譜柱(24小時(shí)以上)。平衡所需時(shí)間與通液量和鹽濃度嚴(yán)密相關(guān)，因而，時(shí)間緊迫時(shí)請(qǐng)?zhí)岣吡魉伲騪H不變而增加活動(dòng)相的鹽濃度來進(jìn)行平衡。
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