凝膠色譜儀洗脫次序和分配系數(shù)K
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時間:2020-01-02 11:28:28
凝膠色譜儀是使用大小不同的分子在多孔固定相(凝膠)中的選擇性浸透來分離的,適用于分離分子量不同的大分子物質(zhì)(Mr>2000)。
一、洗脫次序:
凝膠色譜中組分與凝膠之間無作用力,僅僅根據(jù)分子量大小來分離。凝膠是有一定孔徑散布范圍的多孔物質(zhì),組分進入色譜柱后,向凝膠的孔中分散,保存程度取決于孔和組分分子的大小。小分子悉數(shù)滲入小孔中,在流經(jīng)色譜柱時閱歷的旅程zui長。大分子徹底被排擠在孔外,閱歷的旅程zui短。中等大小分子滲入部分較大的孔,而被較小的孔排擠,閱歷的旅程居中。故洗脫次序是組分分子大?。ǚ肿恿浚┑暮瘮?shù)。
二、分配系數(shù)K:
組分進入色譜柱,從高濃度的流動相向凝膠的孔中分散,分散平衡時:
小分子一半在孔內(nèi),一半在孔外,K = 1。
大分子(直徑大于凝膠孔徑),被悉數(shù)排擠在凝膠孔隙外,K = 0。
中等大小分子的直徑介于以上兩種極限之間,0<K<1。
故在凝膠色譜中,0≤K≤1。
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