差速離心法使用介紹
差速離心法指分步改變離心轉(zhuǎn)速或向速崎低速離心交替進行，選用巨細不向的離心力使具備不同質(zhì)量、不同沉降系數(shù)的細小顆粒(粒子或大分子)從混合的懸浮液中分批沉降而進行別離的力法。該辦法適用于在懸浮液中的樣品顆粒之間重量存在較大差別，更精確地說是沉降系數(shù)的差別在一個到幾個數(shù)量級的混合樣品的別離。重量或S值的差別越大，別離的作用越好。對于差別較小的顆粒，差速離心法就很難得到滿意的別離作用。這種離心辦法是通過得到沉積或得到除掉大的顆粒后的上清液來進行別離、提取。該辦法又稱差速沉積法。
差速沉積離心一般選用角轉(zhuǎn)子。在離心開始時，一切顆粒都均勻地分布在整個離心管中，離心期間各種顆粒以不問速度向管底沉降，纖過必定時刻，zui重的或S值zui大的顧粒全部沉別管底，得到不合這種顆粒的上清液。將上清液進一步以更高轉(zhuǎn)速離心必定時刻，又對得到次輕的顆粒，逐漸增加離心轉(zhuǎn)速就可以分步得到不同質(zhì)量、不同S值的顆粒樣品，達到別離的意圖。
但是每次得到的沉積并不均一，這是因為各種巨細和密度的顆粒的離心管中均勻分布，經(jīng)必定時刻離心后全部zui重的顆粘達到管底時，離心開始時離管底較近處的較輕顆粒也沉到管底而混于該重顆粒之中，所以還要將沉積再懸浮，以本來的轉(zhuǎn)速再次離心，取得的沉積將愈加“純”一些，這樣反復(fù)幾回就可以得到基本上巨細均一的“純”樣品。這個過程稱為“洗”沉積。將每次洗過的上清液合并起來以更向轉(zhuǎn)速離心，從上清液或沉積得到別離提純的另一組分。
差速離心常用來別離各種化細胞器從粗提核酸、蛋白質(zhì)。例如組織勾漿可根據(jù)它們的S值巨細與具他組分提山來。這種辦法將zui初的沉積反復(fù)地懸浮和離心2—3次就能得到一個相對純的亞細腦組分，但得到的糾分也不是均一，可以進一步用一種連續(xù)的液體密度梯度替代均勻的懸浮介質(zhì)，然后得到一個更好的別離。
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