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色譜柱塔板理論介紹

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時間:2018-12-20 11:27:58

1941年馬丁和辛格建立的“塔板理論”模型將色譜柱看作一個分餾塔,設(shè)想其中均勻分布許多塔板,并認為在每個塔板的間隔空間內(nèi),組分在兩相中立即達到分配平衡,經(jīng)過多次的分配平衡后,分配系數(shù)小的組分先流出色譜柱,并得到描述色譜流出曲線的表達式。


一、塔板理論的基本假設(shè)為:


1) 色譜柱內(nèi)存在許多塔板,組分在塔板間隔(即塔板高度)內(nèi)完全服從分配定律,并很快達到分配平衡。


2) 樣品加在第0號塔板上,樣品沿色譜柱軸方向的擴散可以忽略。


3) 流動相在色譜柱內(nèi)間歇式流動,每次進入一個塔板體積。


4) 在所有塔板上分配系數(shù)相等,與組分的量無關(guān)。


雖然以上假設(shè)與實際色譜過程不符,如色譜過程是一個動態(tài)過程,很難達到分配平衡;組分沿色譜柱軸方向的擴散是不可避免的。但是塔板理論導(dǎo)出了色譜流出曲線方程,成功地解釋了流出曲線的形狀、濃度極大點的位置,能夠評價色譜柱柱效。


二、色譜流出曲線方程及定量參數(shù)(峰高h和峰面積A)


由色譜流出曲線方程可知:當t=tR時,濃度C有極大值。Cmax就是色譜峰的峰高。因此:①當實驗條件一定時(即σ一定),峰高h與組分的量C0(進樣量)成正比,所以正常峰的峰高可用于定量分析。②當進樣量一定時,σ越小(柱效越高),峰高越高,因此提高柱效能提高HPLC分析的靈敏度。


由流出曲線方程對V(0~∞)求積分,即得出色譜峰面積A。可見A相當于組分進樣量C0,因此是常用的定量參數(shù)。把Cmax=h和Wh/2=2.355σ代入上式,即得A=1.064×Wh/2×h,此為正常峰的峰面積計算公式。



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