C18色譜柱和C8的區(qū)別及C18色譜柱壽命、維護(hù)、被污染怎么辦
C8柱是修飾的帶8個(gè)碳原子的硅烷,而C18是修飾的18個(gè)碳原子的硅烷。通常,我們檢測(cè)樣品首先選用C18柱;如果樣品的分子量較大,就選C8;如果分子量再大,就選C4。(不過(guò)也不是絕對(duì),個(gè)人認(rèn)為選擇適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)相更重要。
問(wèn):正常一個(gè)C18色譜柱使用壽命?
答:柱壽命一般不按時(shí)間計(jì)算,按持續(xù)進(jìn)樣針數(shù)比較科學(xué)。一般正常使用維護(hù),不超過(guò)pH和溫度等范圍,C18柱能達(dá)到500-2000針進(jìn)樣的壽命,視樣品干凈程度的不同而不同。
問(wèn):一根常用的c18色譜柱,拿到一根新柱的時(shí)候應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù)?為什么要這樣做?
答:新柱活化,實(shí)際上是一個(gè)平衡的過(guò)程,除了用流動(dòng)相平衡外,有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡,特別是測(cè)定分子量比較高的多肽,尤其重要。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子,擴(kuò)散速度慢,平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng)。具體平衡方式也很簡(jiǎn)單,多進(jìn)幾次樣品,直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定,再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。
如果要加快平衡時(shí)間,把前面用來(lái)平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進(jìn)樣多針。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡,目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。
問(wèn):做農(nóng)藥殘留分析的,不同的基質(zhì)雜質(zhì)含量是不同的,我用C18分析時(shí)有可能一次就污染了,我用高流速,和反向沖洗都解決不了,是不是這根柱子就廢了,有沒(méi)有其他的辦法?
答:高流速反向沖洗是對(duì)的,關(guān)鍵你用了什么溶劑沖洗呢?用原來(lái)的流動(dòng)相沖洗肯定不管用,要不然就不會(huì)累積在柱子上了。你應(yīng)該用流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑B沖洗,如果不行,就需要啟用再生的程序,當(dāng)然再生時(shí)用的溶劑更強(qiáng)。
相關(guān)閱讀:氣相色譜儀不能點(diǎn)火或熄火主要原因
{來(lái)源|儀器無(wú)憂網(wǎng),根據(jù)專(zhuān)業(yè)書(shū)籍以及網(wǎng)絡(luò)資料編輯創(chuàng)作、轉(zhuǎn)載需聯(lián)系我們授權(quán)}